Ágar Sangue

PRINCÍPIO 

O meio de Ágar sangue, usando uma base rica como abaixo descrita, oferece ótimas condições de crescimento a maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos, úteis para a diferenciação de Streptococcus spp. e Staphylococcus spp. 

UTILIDADE

Usado para o isolamento de microrganismos não fastidiosos.

Verificação de hemólise dos Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.

Usado na prova de satelitismo (para identificação presuntiva de Haemophilus spp.).

FÓRMULA / PRODUTO 

Meio comercial: Blood Ágar Base, Columbia Ágar Base, BHI Ágar, Mueller Hinton Ágar;

Sangue desfibrinado de carneiro ou coelho: 5 ml para cada 100 ml de meio base; pH: 6,8 +/- 0,2

PROCEDIMENTOS 

Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante;

Esterilizar em autoclave; 

Esfriar a base à +/- 50ºC; 

Adicionar 5 ml de sangue desfibrinado de carneiro para cada 100 ml de base; 

Homogeneizar delicadamente para não formar bolhas; 

Distribuir em placas de Petri de 90 mm de diâmetro. 

CONTROLE DE QUALIDADE  

Hemólise beta hemolítica: Streptococcus pyogenes ATCC 19615 ou Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Hemólise alfa hemolítica: Streptococcus do grupo viridans ou Streptococcus pneumoniae ATCC 6305.

Hemólise gama (sem hemólise): Enterococcus faecalis ATCC 29212 ou Staphylococcus epidermidis ATCC 12228.

CONSERVAÇÃO E VALIDADE 

Conservar de 4 a 10°C por 4 meses.

INOCULAÇÃO 

Estriar a superfície do meio, usando a técnica de semeadura para isolamento;

No final da semeadura, picar o meio com a alça para verificar hemólise em profundidade;

Incubar à 35ºC 24 horas.

INTERPRETAÇÃO 

Cor original do meio: vermelho.

Beta hemólise: presença de halo transparente ao redor das colônias semeadas (lise total dos eritrócitos).

Alfa hemólise: presença de halo esverdeado ao redor das colônias semeadas (lise parcial dos eritrócitos). 

Gama hemólise (sem hemólise): ausência de halo ao redor das colônias (eritrócitos permanecem íntegros). 

RECOMENDAÇÕES 

Não usar sangue de carneiro vencido, pois o meio fica hemolisado ou com cor muito escura, dificultando o estudo de hemólise;

Não usar sangue humano, pois alguns microrganismos não apresentam hemólise; 

Não adicionar o sangue na base do meio quente, pois as hemácias rompem-se, dificultando o estude de hemólise; 

Por ser um meio rico, o crescimento a partir de materiais biológicos em geral costuma ser abundante, sempre que necessário, isolar a colônia em estudo para os procedimentos de identificação, para não correr o risco de trabalhar com cepas misturadas.

     


Deus seja louvado